വാർത്ത

പോളിമറേസ് ചെയിൻ പ്രതികരണം (പിസിആർ)

AP.BIO:

IST ‑ 1 (EU)

,

IST ‑ 1.P (LO)

,

IST ‑ 1.P.1 (EK)

ഡിഎൻഎയുടെ ഒരു നിർദ്ദിഷ്ട ടാർഗെറ്റ് ഏരിയ വർദ്ധിപ്പിക്കാനോ അല്ലെങ്കിൽ നിരവധി പകർപ്പുകൾ ഉണ്ടാക്കാനോ ഉപയോഗിക്കുന്ന ഒരു സാങ്കേതികത.

 

പ്രധാന പോയിന്റുകൾ:

  • പോളിമറേസ് ചെയിൻ പ്രതികരണം, അഥവാ പിസിആർ, ഒരു നിർദ്ദിഷ്ട ഡിഎൻഎ മേഖലയുടെ നിരവധി പകർപ്പുകൾ ഉണ്ടാക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു സാങ്കേതികതയാണ് വിട്രോയിൽ (ഒരു ജീവിയെക്കാൾ ഒരു ടെസ്റ്റ് ട്യൂബിൽ).
  • പിസിആർ ഒരു തെർമോസ്റ്റബിൾ ഡിഎൻഎ പോളിമറേസിനെ ആശ്രയിക്കുന്നു, ടാക് പോളിമറേസ്ഡിഎൻഎ ആവശ്യമാണ് പ്രൈമറുകൾ താൽപ്പര്യമുള്ള ഡി‌എൻ‌എ മേഖലയ്‌ക്കായി പ്രത്യേകം രൂപകൽപ്പന ചെയ്‌തിരിക്കുന്നു.
  • പിസിആറിൽ, പ്രതിപ്രവർത്തനത്തെ താപനില മാറ്റങ്ങളുടെ ഒരു പരമ്പരയിലൂടെ ആവർത്തിച്ച് സൈക്കിൾ ചെയ്യുന്നു, ഇത് ടാർഗെറ്റ് മേഖലയുടെ നിരവധി പകർപ്പുകൾ നിർമ്മിക്കാൻ അനുവദിക്കുന്നു.
  • പിസിആറിന് ധാരാളം ഗവേഷണങ്ങളും പ്രായോഗിക പ്രയോഗങ്ങളും ഉണ്ട്. ഡിഎൻഎ ക്ലോണിംഗ്, മെഡിക്കൽ ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സ്, ഡിഎൻഎയുടെ ഫോറൻസിക് വിശകലനം എന്നിവയിൽ ഇത് പതിവായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.

എന്താണ് പിസിആർ?

പോളിമറേസ് ചെയിൻ പ്രതികരണം (പിസിആർ) ഡിഎൻഎയുടെ ഒരു പ്രത്യേക പ്രദേശത്തിന്റെ നിരവധി പകർപ്പുകൾ (ദശലക്ഷക്കണക്കിന് അല്ലെങ്കിൽ ശതകോടികൾ!) ഉണ്ടാക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്ന ഒരു സാധാരണ ലബോറട്ടറി സാങ്കേതികതയാണ്. ഈ ഡിഎൻഎ പ്രദേശം പരീക്ഷണാർത്ഥിക്ക് താൽപ്പര്യമുള്ള എന്തും ആകാം. ഉദാഹരണത്തിന്, ഒരു ഗവേഷകൻ മനസ്സിലാക്കാൻ ആഗ്രഹിക്കുന്ന ഒരു ജീൻ അല്ലെങ്കിൽ കുറ്റകൃത്യങ്ങൾ സംഭവിച്ച ഡിഎൻഎയുമായി സംശയിക്കുന്നവരുമായി ഫോറൻസിക് ശാസ്ത്രജ്ഞർ ഉപയോഗിക്കുന്ന ജനിതക മാർക്കർ ആയിരിക്കാം.

സാധാരണഗതിയിൽ, പിസിആറിന്റെ ലക്ഷ്യം ലക്ഷ്യം വെച്ച ഡിഎൻഎ മേഖലയെ വേണ്ടവിധം വിശകലനം ചെയ്യുകയോ മറ്റേതെങ്കിലും വിധത്തിൽ ഉപയോഗിക്കുകയോ ചെയ്യുക എന്നതാണ്. ഉദാഹരണത്തിന്, പിസിആർ ആംപ്ലിഫൈ ചെയ്ത ഡിഎൻഎ അയച്ചേക്കാം ക്രമപ്പെടുത്തൽ, ദൃശ്യവൽക്കരിച്ചത് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ്, അഥവാ ക്ലോൺ ചെയ്തു കൂടുതൽ പരീക്ഷണങ്ങൾക്കായി ഒരു പ്ലാസ്മിഡിലേക്ക്.

മോളിക്യുലർ ബയോളജി റിസർച്ച്, മെഡിക്കൽ ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സ്, പാരിസ്ഥിതികത്തിന്റെ ചില ശാഖകൾ എന്നിവയുൾപ്പെടെ ജീവശാസ്ത്രത്തിന്റെയും വൈദ്യശാസ്ത്രത്തിന്റെയും പല മേഖലകളിലും പിസിആർ ഉപയോഗിക്കുന്നു.

ടാക് പോളിമറേസ്

പോലെ ഡി.എൻ.എ ഒരു ജീവിയിൽ, പിസിആറിന് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് എൻസൈം ആവശ്യമാണ്, അത് ഡിഎൻഎയുടെ പുതിയ സരണികൾ ഉണ്ടാക്കുന്നു, നിലവിലുള്ള സരണികൾ ടെംപ്ലേറ്റുകളായി ഉപയോഗിക്കുന്നു. പിസിആറിൽ സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്ന ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് എന്ന് വിളിക്കുന്നു ടാക് പോളിമറേസ്, ചൂട്-സഹിഷ്ണുത ബാക്ടീരിയയിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത ശേഷം (Tഹെർമസ് aquaticus).

ടി. അക്വാറ്റിക്കസ് ചൂടു നീരുറവകളിലും ജലവൈദ്യുത ദ്വാരങ്ങളിലും വസിക്കുന്നു. അതിന്റെ ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് വളരെ ചൂട് സ്ഥിരതയുള്ളതും 70 ° \ ടെക്സ്റ്റ് C70 ° C70, °, സ്റ്റാർട്ട് ടെക്സ്റ്റ്, സി, എൻഡ് ടെക്സ്റ്റ് (ഒരു മനുഷ്യൻ അല്ലെങ്കിൽ കോളി ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് പ്രവർത്തനരഹിതമായിരിക്കും). ഈ താപ-സ്ഥിരത പിസിആറിന് അനുയോജ്യമായ തഖ് പോളിമറേസ് ഉണ്ടാക്കുന്നു. നമ്മൾ കാണുന്നതുപോലെ, ഉയർന്ന താപനില പിസിആറിൽ ആവർത്തിച്ച് ഉപയോഗിക്കുന്നു നിഷേധം ടെംപ്ലേറ്റ് ഡിഎൻഎ, അല്ലെങ്കിൽ അതിന്റെ സരണികൾ വേർതിരിക്കുക.

പിസിആർ പ്രൈമറുകൾ

മറ്റ് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസുകളെപ്പോലെ, ടാക് പോളിമറാസിന് ഡിഎൻഎ നൽകിയാൽ മാത്രമേ ഡിഎൻഎ ഉണ്ടാക്കാൻ കഴിയൂ പ്രൈമർ, ന്യൂക്ലിയോടൈഡുകളുടെ ഒരു ചെറിയ ശ്രേണി, ഡിഎൻഎ സിന്തസിസിന് ഒരു ആരംഭ പോയിന്റ് നൽകുന്നു. ഒരു പിസിആർ പ്രതികരണത്തിൽ, അവൾ അല്ലെങ്കിൽ അവൻ തിരഞ്ഞെടുക്കുന്ന പ്രൈമറുകൾ ഉപയോഗിച്ച് പകർത്തുകയോ വർദ്ധിപ്പിക്കുകയോ ചെയ്യുന്ന ഡിഎൻഎയുടെ പ്രദേശം പരീക്ഷകൻ നിർണ്ണയിക്കുന്നു.

PCR പ്രൈമറുകൾ സിംഗിൾ-സ്ട്രാൻഡ് ഡിഎൻഎയുടെ ചെറിയ ഭാഗങ്ങളാണ്, സാധാരണയായി 202020 ന്യൂക്ലിയോടൈഡുകളുടെ നീളം. ഓരോ പിസിആർ പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിലും രണ്ട് പ്രൈമറുകൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു, കൂടാതെ അവ രൂപകൽപ്പന ചെയ്തിരിക്കുന്നത് അവ ലക്ഷ്യമിട്ട പ്രദേശത്തെ (പകർത്തേണ്ട പ്രദേശം) ഉൾക്കൊള്ളുന്ന തരത്തിലാണ്. അതായത്, ഡി‌എൻ‌എ ടെംപ്ലേറ്റിന്റെ വിപരീത സരണികളുമായി ബന്ധിപ്പിക്കാൻ കഴിയുന്ന സീക്വൻസുകൾ അവർക്ക് നൽകിയിരിക്കുന്നു, പകർപ്പാക്കേണ്ട പ്രദേശത്തിന്റെ അരികുകളിൽ. പ്രൈമറുകൾ കോംപ്ലിമെന്ററി ബേസ് ജോടിയാക്കൽ ഉപയോഗിച്ച് ടെംപ്ലേറ്റുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുന്നു.

ടെംപ്ലേറ്റ് ഡിഎൻഎ:

5 ′ TATCAGATCCATGGT ... GAGTACTAGTCCTATGAGT 3 ′ 3 ′ ATAGTCTAGGTACCTCA ... CTCATGATCAGGATACTCA 5 ′

പ്രൈമർ 1: 5 ′ CAGATCCATGG 3 ′ പ്രൈമർ 2:

പ്രൈമറുകൾ ടെംപ്ലേറ്റിലേക്ക് ബന്ധിപ്പിക്കുമ്പോൾ, അവ പോളിമറേസ് ഉപയോഗിച്ച് വിപുലീകരിക്കാൻ കഴിയും, അവയ്ക്കിടയിൽ കിടക്കുന്ന പ്രദേശം പകർത്തപ്പെടും.

[ഡിഎൻഎയും പ്രൈമർ ദിശയും കാണിക്കുന്ന കൂടുതൽ വിശദമായ ഡയഗ്രം]

പിസിആറിന്റെ ഘട്ടങ്ങൾ

ഒരു പിസിആർ പ്രതികരണത്തിന്റെ പ്രധാന ചേരുവകൾ ഇവയാണ് ടാക് പോളിമറേസ്, പ്രൈമറുകൾ, ടെംപ്ലേറ്റ് ഡിഎൻഎ, ന്യൂക്ലിയോടൈഡുകൾ (ഡിഎൻഎ ബിൽഡിംഗ് ബ്ലോക്കുകൾ). എൻസൈമിന് ആവശ്യമായ കോഫാക്ടറുകൾക്കൊപ്പം ചേരുവകൾ ഒരു ട്യൂബിൽ ഒത്തുചേരുന്നു, കൂടാതെ ഡിഎൻഎ സമന്വയിപ്പിക്കാൻ അനുവദിക്കുന്ന താപത്തിന്റെയും തണുപ്പിക്കലിന്റെയും ആവർത്തിച്ചുള്ള ചക്രങ്ങളിലൂടെ കടന്നുപോകുന്നു.

അടിസ്ഥാന ഘട്ടങ്ങൾ ഇവയാണ്:

  1. ഡിനാറ്ററേഷൻ (96 ° \ ടെക്സ്റ്റ് C96 ° C96, °, സ്റ്റാർട്ട് ടെക്സ്റ്റ്, സി, എൻഡ് ടെക്സ്റ്റ്): ഡിഎൻഎ സ്ട്രോണ്ടുകളെ വേർതിരിക്കുന്നതിനോ നിഷേധിക്കുന്നതിനോ പ്രതികരണം ശക്തമായി ചൂടാക്കുക. ഇത് അടുത്ത ഘട്ടത്തിനായി ഒറ്റ-ഒറ്റപ്പെട്ട ടെംപ്ലേറ്റ് നൽകുന്നു.
  2. അനിയലിംഗ് (555555 - 656565 ° \ ടെക്സ്റ്റ് C ° C °, ടെക്സ്റ്റ് ആരംഭിക്കുക, C, എൻഡ് ടെക്സ്റ്റ്): പ്രൈമറുകൾക്ക് സിംഗിൾ -സ്ട്രാൻഡഡ് ടെംപ്ലേറ്റ് ഡി.എൻ.എ.
  3. വിപുലീകരണം (72 ° \ ടെക്സ്റ്റ് C72 ° C72, °, സ്റ്റാർട്ട് ടെക്സ്റ്റ്, സി, എൻഡ് ടെക്സ്റ്റ്): പ്രതികരണ താപനില ഉയർത്തുക ടാക് പോളിമറേസ് പ്രൈമറുകൾ വികസിപ്പിക്കുകയും ഡിഎൻഎയുടെ പുതിയ സരണികൾ സമന്വയിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.

ഈ ചക്രം ഒരു സാധാരണ PCR പ്രതികരണത്തിൽ 252525 - 353535 തവണ ആവർത്തിക്കുന്നു, ഇത് സാധാരണയായി പകർത്തിയ DNA മേഖലയുടെ ദൈർഘ്യത്തെ ആശ്രയിച്ച് 222 - 444 മണിക്കൂർ എടുക്കും. പ്രതികരണം കാര്യക്ഷമമാണെങ്കിൽ (നന്നായി പ്രവർത്തിക്കുന്നു), ടാർഗെറ്റ് ചെയ്ത മേഖലയ്ക്ക് ഒന്നോ അതിലധികമോ കോപ്പികളിൽ നിന്ന് ശതകോടികളിലേക്ക് പോകാം.

ഓരോ തവണയും ടെംപ്ലേറ്റ് ആയി ഉപയോഗിക്കുന്നത് യഥാർത്ഥ ഡിഎൻഎ മാത്രമല്ല കാരണം. പകരം, ഒരു റൗണ്ടിൽ നിർമ്മിച്ച പുതിയ ഡിഎൻഎ അടുത്ത റൗണ്ട് ഡിഎൻഎ സിന്തസിസിൽ ഒരു ടെംപ്ലേറ്റായി വർത്തിക്കും. പ്രൈമറുകളുടെയും നിരവധി തന്മാത്രകളുടെയും നിരവധി പകർപ്പുകൾ ഉണ്ട് ടാക് പ്രതികരണത്തിൽ പൊങ്ങിക്കിടക്കുന്ന പോളിമറേസ്, അതിനാൽ ഓരോ റൗണ്ട് സൈക്ലിംഗിലും ഡിഎൻഎ തന്മാത്രകളുടെ എണ്ണം ഏകദേശം ഇരട്ടിയാകും. എക്സ്പോണൻഷ്യൽ വളർച്ചയുടെ ഈ മാതൃക ചുവടെയുള്ള ചിത്രത്തിൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു.

പിസിആറിന്റെ ഫലങ്ങൾ കാണുന്നതിന് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ഉപയോഗിക്കുന്നു

ഒരു പിസിആർ പ്രതികരണത്തിന്റെ ഫലങ്ങൾ സാധാരണയായി ദൃശ്യവൽക്കരിക്കപ്പെടുന്നു (ദൃശ്യമാക്കുന്നു) ഉപയോഗിച്ച് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ്ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ഒരു വൈദ്യുത പ്രവാഹത്തിലൂടെ ജെൽ മാട്രിക്സിലൂടെ ഡിഎൻഎയുടെ ശകലങ്ങൾ വലിച്ചെടുക്കുന്ന ഒരു സാങ്കേതികതയാണ്, അത് ഡിഎൻഎ ശകലങ്ങളെ വലിപ്പം അനുസരിച്ച് വേർതിരിക്കുന്നു. ഒരു സ്റ്റാൻഡേർഡ്, അല്ലെങ്കിൽ ഡി‌എൻ‌എ ഗോവണി സാധാരണയായി ഉൾപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്നതിനാൽ പി‌സി‌ആർ സാമ്പിളിലെ ശകലങ്ങളുടെ വലുപ്പം നിർണ്ണയിക്കാനാകും.

അതേ നീളത്തിലുള്ള ഡിഎൻഎ ശകലങ്ങൾ ജെല്ലിൽ ഒരു "ബാൻഡ്" ഉണ്ടാക്കുന്നു, ഡിഎൻഎ-ബൈൻഡിംഗ് ഡൈ ഉപയോഗിച്ച് ജെൽ കറയുണ്ടെങ്കിൽ അത് കണ്ണിൽ കാണാം. ഉദാഹരണത്തിന്, 400400400 ബേസ് ജോഡി (ബിപി) ശകലം നിർമ്മിക്കുന്ന ഒരു പിസിആർ പ്രതികരണം ഒരു ജെല്ലിൽ ഇതുപോലെ കാണപ്പെടും:

ഇടത് പാത: 100, 200, 300, 400, 500 ബിപി ബാൻഡുകളുള്ള ഡിഎൻഎ ഗോവണി.

വലത് പാത: പിസിആർ പ്രതികരണത്തിന്റെ ഫലം, 400 ബിപിയിൽ ഒരു ബാൻഡ്.

ഒരു ഡിഎൻഎ ബാൻഡിൽ ഒന്നോ അതിലധികമോ കോപ്പികൾ മാത്രമല്ല, ലക്ഷ്യമിട്ട ഡിഎൻഎ മേഖലയുടെ നിരവധി പകർപ്പുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. ഡി‌എൻ‌എ സൂക്ഷ്മദർശിയായതിനാൽ, നമുക്ക് അത് കണ്ണുകൊണ്ട് കാണുന്നതിനുമുമ്പ് അതിന്റെ ധാരാളം പകർപ്പുകൾ ഉണ്ടായിരിക്കണം. പിസിആർ ഒരു പ്രധാന ഉപകരണമാകുന്നതിന്റെ ഒരു വലിയ ഭാഗമാണിത്: ഡിഎൻഎയുടെ ആ പ്രദേശം നമുക്ക് കാണാനോ കൈകാര്യം ചെയ്യാനോ കഴിയുന്ന ഒരു ഡിഎൻഎ സീക്വൻസിന്റെ മതിയായ പകർപ്പുകൾ ഇത് നിർമ്മിക്കുന്നു.

പിസിആറിന്റെ അപേക്ഷകൾ

പിസിആർ ഉപയോഗിച്ച്, ഒരു ഡിഎൻഎ ശ്രേണി ദശലക്ഷക്കണക്കിന് അല്ലെങ്കിൽ ബില്യൺ തവണ വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ കഴിയും, മറ്റ് സാങ്കേതിക വിദ്യകൾ ഉപയോഗിച്ച് വിശകലനം ചെയ്യാൻ ആവശ്യമായ ഡിഎൻഎ പകർപ്പുകൾ നിർമ്മിക്കുന്നു. ഉദാഹരണത്തിന്, ഡിഎൻഎ അയച്ച ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് വഴി ദൃശ്യവൽക്കരിക്കപ്പെട്ടേക്കാം ക്രമപ്പെടുത്തൽ, അല്ലെങ്കിൽ നിയന്ത്രണ എൻസൈമുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ദഹിക്കുന്നു ക്ലോൺ ചെയ്തു ഒരു പ്ലാസ്മിഡിലേക്ക്.

പല ഗവേഷണ ലാബുകളിലും പിസിആർ ഉപയോഗിക്കുന്നു, കൂടാതെ ഫോറൻസിക്, ജനിതക പരിശോധന, ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സ് എന്നിവയിലും പ്രായോഗിക പ്രയോഗങ്ങളുണ്ട്. ഉദാഹരണത്തിന്, രോഗികളുടെ ഡി‌എൻ‌എയിൽ നിന്ന് (അല്ലെങ്കിൽ ഗര്ഭപിണ്ഡത്തിന്റെ ഡിഎൻഎയിൽ നിന്ന്, ജനനത്തിനു മുമ്പുള്ള പരിശോധനയുടെ കാര്യത്തിൽ) ജനിതക വൈകല്യങ്ങളുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ജീനുകളെ വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ പിസിആർ ഉപയോഗിക്കുന്നു. ഒരു രോഗിയുടെ ശരീരത്തിൽ ഒരു ബാക്ടീരിയ അല്ലെങ്കിൽ ഡിഎൻഎ വൈറസ് പരിശോധിക്കുന്നതിനും പിസിആർ ഉപയോഗിക്കാം: രോഗകാരി ഉണ്ടെങ്കിൽ, രക്തത്തിൽ നിന്നോ ടിഷ്യു സാമ്പിളിൽ നിന്നോ ഡിഎൻഎയുടെ പ്രദേശങ്ങൾ വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ കഴിയും.

സാമ്പിൾ പ്രശ്നം: ഫോറൻസിക്സിൽ പിസിആർ

നിങ്ങൾ ഒരു ഫോറൻസിക് ലാബിലാണ് ജോലി ചെയ്യുന്നതെന്ന് കരുതുക. ഒരു കുറ്റകൃത്യസ്ഥലത്ത് അവശേഷിക്കുന്ന മുടിയിൽ നിന്ന് നിങ്ങൾക്ക് ഒരു ഡിഎൻഎ സാമ്പിളും മൂന്ന് സംശയാസ്പദമായ ഡിഎൻഎ സാമ്പിളുകളും ലഭിച്ചു. നിങ്ങളുടെ ജോലി ഒരു പ്രത്യേക ജനിതക മാർക്കർ പരിശോധിച്ച് മൂന്ന് സംശയിക്കുന്നവരിൽ ആരെങ്കിലും ഈ മാർക്കറിനുള്ള മുടി ഡിഎൻഎയുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നുണ്ടോ എന്ന് നോക്കുക എന്നതാണ്.

മാർക്കർ രണ്ട് അല്ലീലുകളിലോ പതിപ്പുകളിലോ വരുന്നു. ഒന്നിൽ ഒരൊറ്റ ആവർത്തനം അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു (താഴെ തവിട്ട് പ്രദേശം), മറ്റൊന്നിൽ ആവർത്തനത്തിന്റെ രണ്ട് പകർപ്പുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. ആവർത്തന മേഖലയിൽ പരന്ന പ്രൈമറുകളുള്ള ഒരു പിസിആർ പ്രതികരണത്തിൽ, ആദ്യത്തെ അല്ലെൽ 200200200 \ ടെക്സ്റ്റ് {ബിപി} ബിപിസ്റ്റാർട്ട് ടെക്സ്റ്റ്, ബി, പി, എൻഡ് ടെക്സ്റ്റ് ഡിഎൻഎ ശകലങ്ങൾ നിർമ്മിക്കുന്നു, രണ്ടാമത്തേത് 300300300 \ ടെക്സ്റ്റ് {ബിപി} ബിപിസ്റ്റാർട്ട് ടെക്സ്റ്റ്, ബി , p, അവസാന വാചകം DNA ശകലം:

മാർക്കർ അല്ലെൽ 1: പ്രൈമർ ഫ്ലാങ്കിംഗ് റിപ്പീറ്റ് റീജൻ ഡിഎൻഎയുടെ 200 ബിപി ശകലം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു

മാർക്കർ അല്ലെൽ 2: പ്രൈമർ ഫ്ലാങ്കിംഗ് റിപ്പീറ്റ് ഏരിയ ഡിഎൻഎയുടെ 300 ബിപി ശകലം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു

നിങ്ങൾ നാല് ഡിഎൻഎ സാമ്പിളുകളിൽ പിസിആർ നടത്തുകയും താഴെ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് വഴി ഫലങ്ങൾ ദൃശ്യമാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു:

ജെലിന് അഞ്ച് പാതകൾ ഉണ്ട്:

ആദ്യ പാത: 100, 200, 300, 400, 500 ബിപി ബാൻഡുകളുള്ള ഡിഎൻഎ ഗോവണി.

രണ്ടാമത്തെ പാത: കുറ്റകൃത്യ സ്ഥലത്ത് നിന്നുള്ള ഡിഎൻഎ, 200 ബിപി ബാൻഡ്.

മൂന്നാം പാത: സംശയാസ്പദമായ #1 ഡിഎൻഎ, 300 ബിപി ബാൻഡ്.

നാലാമത്തെ പാത: സംശയാസ്പദമായ #2 DNA, 200, 300 bp ബാൻഡുകൾ.

അഞ്ചാമത്തെ പാത: സംശയാസ്പദമായ #3 ഡിഎൻഎ, 200 ബിപി ബാൻഡ്.

ഈ മാർക്കറിലെ കുറ്റകൃത്യസ്ഥലത്തുനിന്നുള്ള ഡിഎൻഎയുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്ന പ്രതിയുടെ ഡിഎൻഎ ഏതാണ്?

1 ഉത്തരം തിരഞ്ഞെടുക്കുക:

1 ഉത്തരം തിരഞ്ഞെടുക്കുക:

(ചോയ്സ് എ)

A

സംശയം 111

(ചോയ്സ് ബി)

B

സംശയം 222

(ചോയ്സ് സി)

C

സംശയം 333

(ചോയ്സ് ഡി)

D

സംശയിക്കുന്ന ആരും

[സൂചന]

നിങ്ങളുടെ ഉത്തരം തരപ്പെടുത്താൻ ഞങ്ങൾക്ക് കഴിഞ്ഞില്ല. നിങ്ങൾ എന്തെങ്കിലും ശൂന്യമായി ഉപേക്ഷിക്കുകയോ അസാധുവായ ഉത്തരം നൽകുകയോ ചെയ്തതായി തോന്നുന്നു.

ചെക്ക്

പിസിആർ, ഫോറൻസിക് എന്നിവയെക്കുറിച്ച് കൂടുതൽ

ഒരു കുറ്റകൃത്യത്തിൽ നിന്നുള്ള ഡിഎൻഎയുടെ യഥാർത്ഥ ഫോറൻസിക് പരിശോധനകളിൽ, സാങ്കേതിക വിദഗ്ധർ മുകളിൽ പറഞ്ഞ ഉദാഹരണത്തിന് സമാനമായ ഒരു വിശകലനം നടത്തും. എന്നിരുന്നാലും, കുറ്റകൃത്യത്തിന്റെ ഡിഎൻഎയും സംശയിക്കുന്നവരുടെ ഡിഎൻഎയും തമ്മിൽ താരതമ്യപ്പെടുത്താവുന്ന നിരവധി വ്യത്യസ്ത മാർക്കറുകൾ (ഉദാഹരണത്തിലെ ഒറ്റ മാർക്കർ മാത്രമല്ല).

കൂടാതെ, ഒരു സാധാരണ ഫോറൻസിക് വിശകലനത്തിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന മാർക്കറുകൾ രണ്ട് വ്യത്യസ്ത രൂപങ്ങളിൽ വരുന്നില്ല. പകരം, അവർ വളരെ ഉയർന്നതാണ് പോളിമോർഫിക് (പോളി = നിരവധി, മോർഫ് = ഫോം). അതായത്, അവ ചെറിയ അളവിൽ നീളത്തിൽ വ്യത്യാസമുള്ള നിരവധി അല്ലീലുകളിൽ വരുന്നു.

ഫോറൻസിക്കിൽ ഏറ്റവും സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്ന മാർക്കറുകൾ, വിളിക്കപ്പെടുന്നു ഹ്രസ്വ ടാൻഡം ആവർത്തിക്കുന്നു (STR- കൾ), ഒരേ ഹ്രസ്വ ന്യൂക്ലിയോടൈഡ് ശ്രേണിയുടെ ആവർത്തിച്ചുള്ള നിരവധി പകർപ്പുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു (സാധാരണയായി, 222 മുതൽ 555 ന്യൂക്ലിയോടൈഡുകൾ വരെ). ഒരു STR- ന്റെ ഒരു അല്ലിലിന് 202020 ആവർത്തനങ്ങളുണ്ടാകാം, മറ്റൊന്നിൽ 181818, മറ്റൊന്ന് വെറും 101010^11 സ്റ്റാർട്ട് സൂപ്പർസ്‌ക്രിപ്റ്റ്, 1, എൻഡ് സൂപ്പർസ്‌ക്രിപ്റ്റ്.

ഒന്നിലധികം മാർക്കറുകൾ പരിശോധിക്കുന്നതിലൂടെ, അവയിൽ ഓരോന്നും പല അല്ലെൽ രൂപങ്ങളിൽ വരുന്നു, ഫോറൻസിക് ശാസ്ത്രജ്ഞർക്ക് ഡിഎൻഎ സാമ്പിളിൽ നിന്ന് തനതായ ജനിതക "വിരലടയാളം" നിർമ്മിക്കാൻ കഴിയും. 131313 മാർക്കറുകൾ ഉപയോഗിച്ചുള്ള ഒരു സാധാരണ STR വിശകലനത്തിൽ, ഒരു തെറ്റായ പോസിറ്റീവിന്റെ (ഒരേ ഡി.എൻ.എ. "വിരലടയാളം" ഉള്ള രണ്ട് ആളുകൾ) 101010 ൽ 111 -ൽ താഴെയാണ് ടെക്സ്റ്റ് {ബില്യൺ ബില്യൺ സ്റ്റാർട്ട് ടെക്സ്റ്റ്, ബി, ഐ, എൽ, എൽ, ഐ, o, n, അവസാന ടെക്സ്റ്റ്^11 സ്റ്റാർട്ട് സൂപ്പർസ്ക്രിപ്റ്റ്, 1, എൻഡ് സൂപ്പർസ്ക്രിപ്റ്റ്!

കുറ്റവാളികളെ ശിക്ഷിക്കാൻ ഡിഎൻഎ തെളിവുകൾ ഉപയോഗിക്കുന്നതിനെക്കുറിച്ച് നമ്മൾ ചിന്തിച്ചേക്കാമെങ്കിലും, വ്യാജമായി കുറ്റം ചുമത്തപ്പെട്ടവരെ (വർഷങ്ങളോളം ജയിലിൽ കിടന്നിരുന്ന ചിലർ ഉൾപ്പെടെ) കുറ്റവിമുക്തരാക്കുന്നതിൽ ഇത് നിർണായക പങ്കു വഹിച്ചിട്ടുണ്ട്. പിതൃത്വം സ്ഥാപിക്കുന്നതിനും ദുരന്തത്തിന്റെ ദൃശ്യങ്ങളിൽ നിന്ന് മനുഷ്യാവശിഷ്ടങ്ങൾ തിരിച്ചറിയുന്നതിനും ഫോറൻസിക് വിശകലനം ഉപയോഗിക്കുന്നു.

[കടപ്പാടും പരാമർശങ്ങളും]

നിങ്ങൾ ഒരു വിദ്യാർത്ഥിയോ അധ്യാപകനോ ആണോ?

വിദ്യാർത്ഥി അധ്യാപകൻ

 


പോസ്റ്റ് സമയം: ജനുവരി-08-2021